熔解温度

更新时间:2024-08-05 10:23

熔解温度(melting temperature,Tm)是指吸光值增加到最大值的一半时的温度称为DNA解链温度或熔点。

定义

熔解温度(melting temperature,Tm)是指吸光值增加到最大值的一半时的温度。DNA的变性从开始解链到完全解链,是在一个相当小的温度内完成,在这一范围内,紫外光吸收值达到最大值的50%时的解链温度,由于这一现象和结晶的融解过程类似,又称融解温度

计算

有多种计算的公式,且各个的精度也各不相同。对于寡核苷酸(oligonucleotides),Tm的计算可以做到基本准确。为了方便计算,我们忽略氢键部分形成的情况。

不妨假设有两个核苷酸A和B,分别在不同的单链DNA上,形成双链的过程可以表示为:

反应的平衡常数可知为:。根据范德霍夫等式可得

由熔解温度的定义可得。又由于,因此Tm也可表示为:

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